桥式PCR被海外专利把控，基因测序国产替代如何绕开其错误累积？
华大智造通过采用自主的DNBSEQ（DNA纳米球与联合探针锚定聚合）技术路线，以滚环扩增替代桥式PCR扩增，从根本上绕开了桥式PCR的海外专利把控及其错误累积问题。 该技术路线不依赖桥式PCR，因此规避了其“标签跳跃（Index Hopping）”等缺陷，无需使用双接头方案进行弥补，实现了基因测序领域的自主可控。
桥式PCR的局限与国产替代的技术选择
桥式PCR的技术缺陷
Illumina等海外企业主导的桥式PCR扩增路线，在测序过程中存在固有缺陷。根据技术对比资料，桥式PCR扩增技术会导致错误累积，并且其搭配的生化技术会产生标签跳跃（Index Hopping），需要额外使用双接头方案来弥补这一不足。此外，新进入者很难突破行业领先者围绕桥式PCR构建的密集专利网。
DNBSEQ的差异化路径
华大智造选择了与桥式PCR完全不同的技术路线——DNA纳米球与联合探针锚定聚合（DNBSEQ）。其核心原理是通过滚环扩增，将待测DNA序列进行无损复制并形成DNA纳米球。这一过程不涉及桥式PCR，因此从原理上绕开了其专利限制和错误累积问题。该技术路线的优势包括：检测准确性高，同时产出数据重复序列率低，能有效减少数据浪费。
技术特点对比
以下是桥式PCR（Illumina）与DNBSEQ（华大智造）主要技术特点的对比：
| 公司 | 核心技术 | 技术特点 | 技术缺点 |
|---|---|---|---|
| Illumina | 桥式PCR扩增与边合成边测序 | 检测准确性高，通量覆盖广 | PCR扩增导致错误累积，产生标签跳跃，需用双接头弥补 |
| 华大智造 | DNA纳米球与联合探针锚定聚合（DNBSEQ） | 检测准确性高，数据重复序列率低，能减少数据浪费 | 相比其他产品增加了一个环化步骤，但可支持自动化 |
常见问题
华大智造的DNBSEQ技术能完全避免桥式PCR的错误吗？
是的，DNBSEQ技术通过滚环扩增形成DNA纳米球，整个过程不涉及桥式PCR扩增，因此从原理上完全规避了桥式PCR带来的错误累积和标签跳跃问题，无需采用双接头方案进行补救。
国产测序仪的自主可控主要体现在哪些方面？
国产测序仪的自主可控主要体现在核心技术的独创性。以华大智造为例，其采用的DNBSEQ技术路线与Illumina的桥式PCR路线完全不同，绕开了后者的专利封锁。同时，华大智造在中国市场的份额已达到较高水平，为国内基因测序产业链提供了自主的设备和试剂选择。
除了华大智造，还有其他国产测序技术路线吗？
根据现有资料，主流的NGS测序技术路线中，国产代表性厂商主要采用DNBSEQ技术路线。其他路线如罗氏454的焦磷酸测序、赛默飞的乳液PCR与半导体测序等，目前主要由海外企业主导。国产替代的核心在于通过独创技术，彻底与原有存量玩家不同。