Sanger测序从人类基因组计划的“金标准”到如今退居验证角色，基因测序行业的关键发展拐点包括：1977年Sanger法诞生确立第一代测序技术；2001年人类基因组计划完成验证其大规模应用能力；2005年前后高通量测序（NGS）技术诞生，以超摩尔定律的速度大幅降低成本、提升通量，最终使Sanger测序被边缘化，仅在小范围验证场景中保留。
第一代测序：金标准的诞生与巅峰
第一代DNA测序技术由桑格（Sanger）和考尔森于1975年开创的链终止法奠定基础。1977年，桑格测定了第一个基因组序列——噬菌体phiX-174，全长5375个碱基。该技术的主要特点是测序读长可达1000bp，准确性高达99.999%，但成本高、通量低，只能分析单个DNA片段。2001年，以改进的Sanger法为基础完成的首个人类基因组计划（HGP）总费用30亿美元，精确度达99.99%，使Sanger测序成为基因测序的“金标准”。
高通量测序：颠覆性的“鸟枪换炮”
在人类基因组计划完成后，基因测序行业迎来高通量测序（NGS）时代。NGS可一次对几百万到几十亿条核酸分子进行并行测序，通量呈指数级提升。以人类全基因组测序成本为例，2001年高达9526.3万美元，到2015年已降至1000美元左右，2022年更降低到100美元。这种“超摩尔定律”式的成本下降，使NGS迅速取代Sanger测序成为主流。
当前格局：Sanger退居验证角色
如今，Sanger测序因成本高、通量低，已不再适用于大规模测序，但在单基因病的基因诊断和产前诊断中仍广泛使用，主要发挥验证作用。而NGS技术持续迭代，华大智造等厂商已将单例全基因组测序成本推进到100美元以下，推动基因测序中下游应用爆发性增长。
常见问题
Sanger测序目前还有哪些应用场景？
Sanger测序因其准确率几乎100%，在单基因病的基因诊断和产前诊断中仍广泛使用，主要用于验证NGS发现的突变位点。
高通量测序如何实现成本断崖式下降？
高通量测序通过大规模并行测序技术，一次可处理数百万到数十亿条核酸分子，同时配合“超摩尔定律”的技术进步，使人类全基因组测序成本从2001年的约1亿美元降至2022年的100美元。
人类基因组计划在测序技术发展中扮演了什么角色？
人类基因组计划以改进的Sanger法为基础，总费用30亿美元，精确度99.99%，验证了大规模测序的可行性，同时也暴露了Sanger法成本高、通量低的缺陷，催生了高通量测序技术的诞生。